В 1990 году Марстерс вместе с Лиан Дэвидсон переехал в Сиэтл, где основал собственную труппу и много играл на сцене.

Зарабатывал на жизнь пением под гитару в ночном клубе в Санта-Монике.

В 1997 году Марстерса пригласили на роль Спайка во втором сезоне сериала «Баффи — истребительница вампиров». Поначалу предполагалось, что персонаж Спайка будет участвовать в сериале несколько серий, но зрителям он понравился и начиная с четвёртого сезона его персонаж стал постоянным героем сериала. К последним сезонам персонаж Джеймса становится одним из основных в сериале, а после окончания съёмок в 2003 году режиссёр Джосс Уидон пригласил Джеймса продолжать играть Спайка на регулярной основе в спин-офф «Ангел».

Британский акцент, необходимый для воплощения роли Спайка, Джеймс копировал у своего партнера по съемочной площадке Энтони Стюарта Хэда, коренного британца.[4]

Кроме ролей в «Баффи — истребительница вампиров» и «Ангел» Марстерс снимался в телесериалах «Тысячелетие», «Тайны Смолвилля», «Без следа», где играл эпизодические роли.

В течение двух лет (с 2003 года до весны 2004 года) был фронтменом рок-группы Ghost of the Robot. Дебютный альбом группы Mad Brilliant вышел 2 февраля 2003 года. Далее последовал выпуск трёх синглов («Valerie», «David Letterman» and «New Man») и концертный тур по Европе.

Последние работы в кино — небольшая роль в экранизации романа ирландской писательницы Сесилии Ахерн «P.S. Я люблю тебя». В настоящее время участвует в съёмках фильма — экранизации манги Акиры Ториямы Dragonball. Марстерс играет роль злодея Пикколо. Фильм выйдет на экраны в начале 2009 года.

Взято с википедии

2000 год
1. Премия «Сатурн» (приз Академии научной фантастики, фэнтези и фильмов ужасов США), номинация в категории «Лучший телевизионный актёр второго плана» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997)
2. Премия Teen Choice Awards в категории «Выбор телевизионного друга» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997)

2001 год
1. ПОБЕДА! Премия «Сатурн», номинация в категории «Лучший телевизионный актёр второго плана» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997).

2002 год
1.ПОБЕДА! Премия Cinescape Genre Face of the Future Award (Лицо будущего поколения) номинация в категории «Лучшая мужская роль» за роль Спайка в телевизионном сериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997)
2. Премия Teen Choice Award в номинации «Выбранный актер» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997)
3. ПОБЕДА! Премия SFX Award в двух номинациях: «Лучшее комедийное исполнение» и «Лучший телевизионный актер» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997)
4. Премия «Сатурн», номинация в категории «Лучший телевизионный актёр второго плана» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997)

2003 год
1. Премия «Сатурн», номинация в категории «Лучший телевизионный актёр второго плана» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997).
2. Премия Golden Satellite Award (Золотой спутник) в номинации «Лучшее исполнение актером роли второго плана в сериале» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997).
3. Премия Teen Choice Award в номинации «Лучший актер /драма, приключения» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997).

2004 год
1. ПОБЕДА! Премия «Сатурн» в категории «Лучший телевизионный актёр второго плана» за роль Спайка в телесериале «Баффи - истребительница вампиров» (1997).

2005 год
1. Премия «Сатурн», номинация в категории «Лучший телевизионный актёр второго плана» за роль Спайка в телесериале «Ангел» (1999)

2008 год
ПОБЕДА! Приз SyFy Genre Awards в категории "Лучший приглашенный актер" за роль капитана Джона Харта в эпизоде "Сквозные ранения" телесериала "Торчвуд" (2008)
ПОБЕДА! Приз в категории "Лучший приглашенный актер в трех и более эпизодах" за роль Брайниака в Смолвилле (2008)